期刊简介
本刊是由中华人民共和国教育部主管，四川大学华西医学中心及华西医院主办的专业性学术期刊,中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊。其办刊宗旨是：尊重学术自由，提倡学术争鸣，鼓励学术创新，促进学术交流。主要以述评、论著、论著摘要、病案报道、临床病理讨论、影像学诊断分析、综述与讲座、学术动态与通讯及国外进展等形式，报道国内外呼吸与危重医学领域领先的科研成果和临床诊疗经验，以及对临床有指导作用，且与临床密切结合的基础理论研究。每期常设栏目为：慢性阻塞性肺疾病(COPD)，哮喘与气道炎症，急性肺损伤机械通气，睡眠与呼吸，感染性疾病，肿瘤，危重监护等。根据杂志全年报道计划，每期开设l-2个重点栏目。主要读者对象为呼吸与危重医学及相关专业的临床医生、护理工作者及科研工作者。
往期目录
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中国呼吸与危重监护杂志
- 杂志名称：中国呼吸与危重监护杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：四川大学华西医学中心,四川大学华西医院
- 国际刊号：1671-6205
- 国内刊号：51-1631/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：美国《化学文摘》收录期刊收录：上海图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰)
hnRNP K siRNA真核表达载体的构建及其在A549肺癌细胞中沉默效应的研究
唐凤鸣；李为民；王冬梅；韩娟
关键词：不均一核糖核蛋白K, 小干扰RNA, 真核表达载体
摘要：目的 构建hnRNP K特异性siRNA真核表达载体,体外观察对hnRNP K基因的沉默作用.方法 采用基因克隆技术,将合成的特异性hnRNP K RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体pSUPER,构建hnRNP K siRNA真核表达载体.采用Lipofect AMINE2000将pSUPER空载体和3个重组质粒(pSUPER/hnRNP K siRNAa,pSUPER/hnRNP K siRNAc和pSUPER/siRNAn)分别导入A549肺癌细胞(a、c、n分别代表hnRNP K编码序列中的A链和c链,以及无意义的对照序列Non链).24 h后用RT-PCR和Western blot技术检测各实验组肺癌细胞内hnRNP K mRNA及蛋白水平的表达情况.结果 成功构建了hnRNP K siRNA真核表达载体.转染hnRNP K siRNAa、hnRNP K siRNAc的肺癌细胞24 h后hnRNP K mRNA相对表达量分别为0.24±0.53和0.28±0.57,较对照组显著降低(P均<0.01);hnRNP K蛋白灰度值分别为0.23±0.11和0.28±0.09,较对照组显著降低(P均<0.05).结论 构建的RNA干扰真核表达载体能明显干扰A549细胞hnRNP K mRNA及蛋白的表达,为进一步研究hnRNP K基因的功能并应用于肺癌的治疗研究奠定了基础.
友情链接